Màu xanh da trời tượng trưng cho bầu trời và nước, là nguồn gốc của cuộc sống. Đây cũng là màu trên lá cờ của của hoàng đế Amir Timur, hay còn gọi là Tamerlane, vị anh hùng vĩ đại nhất trong lịch sử Uzbekistan, người đã đánh bại Đế chế Ottoman hùng mạnh vào thế kỷ 14.
Dải sọc trắng ở giữa lá cờ biểu tượng của hòa bình, đạo đức và tinh thần trong sạch. Theo trang Advantour, màu trắng cũng là biểu tượng trong câu nói tiếng Uzbek thông thường "Ok yu", có nghĩa là "đi trong hòa bình".
Dải màu xanh lá cây tượng trưng cho thiên nhiên, kỷ nguyên mới và đồng thời biểu tượng cho đạo Hồi. Bên cạnh đó, màu này cũng mang ý nghĩa bảo vệ thiên nhiên, hài hòa với phong trào Hòa bình xanh đang thịnh hành trên thế giới.
Các sọc phân cách mảnh hơn màu đỏ tượng trưng cho năng lượng sống còn trong cơ thể, đồng thời thể hiện sự kết nối tư tưởng tinh khiết và cao quý của con người với bầu trời và trái đất.
Mặt trăng lưỡi liềm là biểu tượng truyền thống lịch sử của Uzbekistan, cũng là biểu tượng cho sự tái lập của nước cộng hòa độc lập. Hình ảnh này là biểu tượng quen thuộc trên quốc kỳ của nhiều quốc gia Hồi giáo, như quốc gia láng giềng Turkmenistan, Thổ Nhĩ Kỳ, Malaysia, Pakistan… Hồi giáo là tôn giáo chiếm trên 90% dân số Uzbekistan.
Mười hai ngôi sao biểu tượng cho 12 tỉnh của đất nước và cũng đại diện cho 12 cung hoàng đạo hay tháng trong năm theo lịch mặt trời, bắt nguồn từ lễ Navruz - lễ đầu năm của cộng đồng người vùng Tiểu Á. Số 12 cũng đồng thời thể hiện 12 nguyên tắc nền móng trong quản lý nhà nước của Uzbekistan.